干货 | Flag还是HA?一文搞定你的表位标签选择困难症!

干货 | Flag还是HA?一文搞定你的表位标签选择困难症!
2023年06月13日 18:44 市场资讯

转自:诺唯赞生物

Flag

序列/长度:DYKDDDDK(8AA)

基质:mAb的抗Flag表位

洗脱条件:pH 3.02-5 mM EDTAFlag peptide

特点

①分子量小,不改变融合蛋白的功能,比同类标签更具亲水性;

②含有肠激酶识别位点(DDDDK),融合在目标蛋白N端便于去除标签;

③3×Flag可使免疫原性和与抗体的亲和性得到极大增强。

适用场景

适用于真核表达系统低表达水平融合蛋白的纯化、检测(WB、IP、IF、ELISA、FC)

HA

序列/长度:(YP)YDVPDYA(7-9AA)

基质:mAb的抗HA表位

洗脱条件:3 M NaSCN50 mMpH NaOH

特点

源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇,避免用于凋亡细胞。

适用场景

蛋白纯化,WB、IP、IF、ELISA、FC

Myc

序列/长度:CEQKLISEEDL(11AA)

基质:mAb的抗Myc表位

洗脱条件:低pH

特点

来源于人类原癌基因Myc,避免用于人源细胞相关实验。

适用场景

一般不用于蛋白纯化,适用于WB、IP、IF、ELISA、FC

V5

序列/长度:GKPIPNPLLGLDST(14AA)

基质:mAb的抗V5表位

洗脱条件:低pH

特点

来源于副粘病毒猴病毒5的P和V蛋白

适用场景

一般不用于蛋白纯化,适用于WB、IP、IF、ELISA、FC

His

序列/长度:n×Hisn=2-10,通常为6)

基质:金属离子(Ni2+、Co2+、Сu2+、Zn2+

洗脱条件:20-250 mM咪唑或低pH

特点

分子量小,不影响目标蛋白的可溶性、结构、功能;纯化后无需切除His标签,免疫原性低。

适用场景

蛋白纯化首选,也可用于检测

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