一看就会！超详细「他莫昔芬给药」攻略

转自：南模生物

如果把咨询鼠博士的售后问题按照频率排序，那么他莫昔芬（Tamoxifen）如何给药一定名列前茅。首先很多同学拿到他莫昔芬就卡在了第一步的溶解上，至于后续的给药剂量，给药频率，给药方式等对于新手都是问题。

本文小编就根据南模的实验方案，结合文献里公开的资料，聊聊他莫昔芬给药的那些事。

1.他莫昔芬的配置和储存

他莫昔芬不溶于水，一般建议用玉米油溶解：可按照20mg/ml的终浓度进行配置，37℃摇晃过夜。由于玉米油太多会导致他莫昔芬溶解度变差，所以建议一次配置50mL以内的他莫昔芬溶液，配置完成后分装成1mL每管，-20℃避光保存，使用时避免反复冻融，正常半年内都是可以使用的。此外，他莫昔芬对光敏感，在制备和储存过程中需要注意避光处理。

他莫昔芬和玉米油的品牌较多，我们常用的如下，仅作参考：

Tamoxifen(Sigma‐Aldrich)：CAS # 10540-29-1

玉米油 (Sigma‐Aldrich) CAS# 8001-30-7

2.他莫昔芬的给药剂量及频次

对于成年小鼠（4周龄以上），他莫昔芬的推荐剂量为75mg/kg-120mg/kg。120mg/kg是我们现在使用比较普遍的一个剂量，一般注射3-5次（我们常用5次），隔天一次；75mg/kg是我们做过的最低剂量，但是给药需要持续5次。幼鼠剂量可以降到100mg/kg。孕鼠及老龄鼠（大于6月龄）的剂量也需要适当减少。

3.他莫昔芬的给药方式

他莫昔芬可以通过腹腔注射、灌胃、饮食或饮水等途径给药，应用最广泛的是腹腔注射给药，腹腔注射的给药剂量精准，便于控制。

腹腔注射给药流程：正确抓取小鼠，将小鼠的鼻子朝向地面，露出腹部；定位动物的中线并将腹部分成四个象限，特别是动物的右下象限，是腹腔注射的合适位置（右下象限缺少重要的解剖结构）；多次腹腔注射时，应交替注射部位。

注：他莫昔芬会影响胎儿发育和生产，诱导的时间尽量选择孕晚期，并同时注射孕酮来减少流产概率。

灌胃给药的给药剂量和频率与腹腔注射相同，在正式实验前，建议同学们先反复练习，熟练掌握灌胃给药的技巧。

饮食/饮水给药使用较少，主要是他莫昔芬水溶性差，小鼠的给药剂量不好量化，且需要的诱导时间较长（一般需要几周进行诱导），在诱导期间往往还伴随着小鼠体重的下降（约10-15%）。

4.注意事项

1.他莫昔芬注射完成后不建议立刻开展实验，一般来讲，停药后需要继续饲养7天，再安排后续实验。

2.对照组小鼠需要同步进行不含他莫昔芬的玉米油溶液给药。

3.未处理的小鼠需要和注射他莫昔芬的小鼠分笼饲养，小鼠舐舔到他莫昔芬悬液，梳毛等行为可能导致意外敲除。

4.加热不会导致他莫昔芬失效，37℃过夜溶解他莫昔芬是没有问题的。

最后，不同的实验方案、不同的小鼠品系、不同的组织器官等对于给药剂量、给药频率和给药方式等的要求往往是不同的，因此，上述方法只是一个参考，面对具体实验时，同学们还应根据参考文献、实验经验先进行预实验，以确定最佳方案。

参考文献：Feil S, Valtcheva N, Feil R. Inducible Cre mice. Methods Mol Biol. 2009;530:343-63.  doi: 10.1007/978-1-59745-471-1_18. PMID: 19266339.

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