新型CD40激动抗体：具有免疫活化抗肿瘤作用|基因_新浪财经

转自：药时空

抗原递呈细胞 (APCs) 表达的 CD40，可以结合 T 细胞上的 CD40L 而调节免疫应答，从而刺激抗原递呈过程与两种细胞亚群的活化。因此，靶向 CD40 的抗体激动剂有潜力成为新的癌症免疫疗法。

目前对 CD40 激动抗体的研究，主要集中在提高疗效和降低毒性上。最近的两篇论文讨论了两种新型 CD40 抗体治疗方法的早期发展。Yan 等人发表了 MAB273 的临床前分析，MAB273 是一种 FcγR 介导的失能交联抗体，发表在 Cellular and Molecular Life Sciences 杂志上。

Coveler 等人则在 Journal for Immunotherapy of Cancer 杂志上报道了 SEACD40 研究的一期研究结果，SEACD40 是一种非聚焦的、Fcγ-受体结合的 CD40 激动抗体。

为了减少 CD40 激动作用的副作用，Yan 等人设计了 MAB273，一种人源兔 IgG1 抗体，在 Fc 区有 L234A, L235A (LALA) 突变，以减少 FcγR 的结合。体外实验表明，该抗体特异性结合 CD40L 结合位点，可诱导人 B 细胞和骨髓树突状细胞 (MDCs) 共刺激标记 CD80、CD70 和淋巴结 (LN) 归巢标记 CCR7 上调，并刺激 B 细胞增殖。

为了确定 MAB273 是否阻止 FcγR 介导的交联，研究人员产生了二价 F(ab ')2 片段(去除Fc区同时保持铰链区)和单价Fab片段(去除Fc区和铰链区)。MAB273 和 F(ab’)2 同样能够以剂量依赖性的方式结合 CD40，而Fab片段的结合较弱。MAB273 和 F(ab’)2 都导致 B 细胞和 MDCs 上 CD80、CD70 和 CCR7 的上调，而Fab片段导致B细胞的活化较弱。因此，这些数据表明 MAB274 的作用不依赖于 FcγR 交联。

研究人员随后对恒河猴体内的 MAB273 进行了三种给药组(静脉注射1 mg/kg;静脉注射 0.1 mg/kg，皮下注射 0.1 mg/kg [SC])。高剂量导致不良事件，而低剂量在两种给药途径下都是安全的。

一般来说，给药 MAB273 导致血小板迅速减少，白细胞，特别是粒细胞增加。中性粒细胞增加，B 细胞和 MDC 减少，这是剂量依赖性的。静脉注射 MAB273 的血浆水平在早期达到峰值并逐渐下降，两周后达到检测不到的水平。然而，在SC组中，MABB273 的水平持续了一周没有下降，这表明抗体释放到血液中的速度较慢，存在储存效应。

给药后，体内 CD40 与 B 细胞和 MDCs 的结合迅速发生，并且在高剂量 IV 组持续72小时。在 SC 组中，这种结合发生得较晚，持续了两周。由于 SC 给药显示免疫刺激，同时也具有储存效应，因此该途径可能毒性较小，使其成为临床开发的兴趣。

荧光标记 SC 注射 MAB273 的生物分布研究表明，大多数抗体在注射部位及其引流LNs中检测到，而在进一步去除的引流周围组织中检测到低水平或无水平。各种装甲运兵车绑定 MAB273；抗体靶向的最丰富的亚群是巨噬细胞、中性粒细胞和单核细胞，而在引流 LNs 中，B 细胞是最靶向的亚群。

研究人员随后对引流 LNs、注射部位皮肤活检和血液进行了 RNAseq。基因集富集分析显示，在研究的三个位点上不同的基因模块发生了变化。在皮肤样本中检测到大多数激活和变化，与细胞表面标记物和趋化因子相关的基因上调，而细胞周期相关的基因下调。在引流 LNs 中，与抗原呈递、干扰素和细胞增殖相关的基因上调，而与 RNA 加工相关的基因下调。在血液中，与干扰素信号、单核细胞和 DC 激活相关的基因上调。

最后，在 6只恒河猴中确定了添加 MAB273 作为疫苗佐剂的价值。其中一组接受7个 HIV-1 包膜糖蛋白 (Env) 肽两次，以建立低水平的免疫，然后用 MAB273 和肽一起增强它们，以模拟治疗性疫苗接种。另一组接种 MAB273 + Env 肽，以模拟预防性疫苗接种。在治疗环境中，单独 Env 肽免疫后检测到特异性T细胞的低频率，在多肽和 MAB273 的促进下增加。在预防性设置中，与单独接种 Env 相比，在初始免疫时检测到更高水平的 T 细胞反应。随后的增强免疫重新激活了 T 细胞，但这些细胞没有达到初始启动免疫所达到的峰值水平。这些数据表明，MAB273 可能会改善癌症环境下的疫苗反应。

为了增强 CD40 的激动作用，Coveler 等人制造了一种非聚焦型的 CD40 激动抗体 Dacetuzumab，以增加与 FcγRIIIa 的结合能力。在此基础上，他们进行了 I期剂量递增试验 (静脉给药)，包括 54名实体瘤患者和 11名淋巴瘤患者。患者经历的大多数不良事件 (AE) 不超过 3级，其中输液相关反应最为常见。2例患者发生 4级 AE；急性心肌梗死 1例，输液/超敏反应 1例。iHR 是常见的不良反应报告，被发现与输液速率有关。因此，研究团队后续采用了标准化的慢速输液方法。30 μg/kg 的剂量是可耐受的，而高剂量由于 iHR 是不可耐受的，即使采用缓慢输注方式。

SEA-CD40 输注以剂量依赖的方式增加外周细胞因子，特别是干扰素 γ 诱导蛋白-10 (IP-10)、单核细胞趋化蛋白-1、干扰素 γ 诱导的单因子 (MIG) 和巨噬细胞炎症蛋白-1b (MIP-1b)。细胞因子在注射后 4-24 小时内升高，24-168 小时内归一化。

治疗还诱导免疫激活和运输，在输注后的头 4小时内 T 细胞、NK 细胞和单核细胞迅速减少。T 细胞 24小时后恢复正常，NK 细胞和单核细胞 72小时后恢复正常。在 B 细胞中也有剂量依赖性的减少。通过诱导T细胞上 CD69 的表达和 NK 细胞上 HLA-DR 的表达来增加活化。

在 44例可分析的实体瘤患者中，6例治疗后肿瘤负担减轻。其中包括 1例部分缓解和 5例 ≥6个月的长期稳定病例。在可分析的7例淋巴瘤患者中，1例有持续完全缓解，维持时间>2年，4例病情稳定，其中1例持续时间>6个月。

总之，这些数据表明 CD40 抗体的突变体可以诱导免疫激活，并且具有相对较好的安全性。评估与其他免疫疗法的联合治疗以进一步增强抗肿瘤免疫反应将是有趣的。

参考文献：

1. Yan X, Ols S, Arcoverde Cerveira R, Lenart K, Hellgren F, Ye K, Cagigi A, Buggert M, Nimmerjahn F, Falkesgaard Højen J, Parera D, Pessara U, Fischer S, Loré K. Cell targeting and immunostimulatory properties of a novel Fcγ-receptor-independent agonistic anti-CD40 antibody in rhesus macaques. Cell Mol Life Sci. 2023 Jun 23.

2. Coveler AL, Smith DC, Phillips T, Curti BD, Goel S, Mehta AN, Kuzel TM, Markovic SN, Rixe O, Bajor DL, Gajewski TF, Gutierrez M, Lee HJ, Gopal AK, Caimi P, Heath EI, Thompson JA, Ansari S, Jacquemont C, Topletz-Erickson A, Zhou P, Schmitt MW, Grilley-Olson JE. Phase 1 dose-escalation study of SEA-CD40: a non-fucosylated CD40 agonist, in advanced solid tumors and lymphomas. J Immunother Cancer. 2023 Jun.